一、官方标准体积参数

1.标准DynePlate专用96孔板

Kibron Delta‑8配套一次性DynePlate聚丙烯微孔板，仪器标称标准测量体积50 μL/孔，为仪器出厂标定、方法开发、CMC测定、高通量筛选的推荐终体积。该体积经过探针浸入深度、液面高度算法匹配，保证DyneProbe八通道探针可以正确浸入液面，获得可靠表面张力读数。

2.允许浮动区间

实际实验可浮动范围40‑60 μL每孔。

低于40 μL，液面高度不足，探针无法可靠浸入，容易出现测值丢失、数据跳变、报探针未接触液面。

高于60 μL，液面过高，探针浸入过深，容易发生孔间液体交叉沾染；振动或者板位移动时液体容易溅出，同时会改变探针受力，带来系统偏移。不允许超过60 μL。

二、不同实验场景体积选择

1.常规高通量筛选、CMC测定、浓度梯度实验

优先固定50 μL每孔。梯度稀释直接在板内完成，定容至50 μL，保证所有孔体积完全一致，消除液面高度带来的系统误差。加样完成后使用透明封板膜封板，减少溶剂挥发；上机前小心撕掉封板膜，避免膜碎屑掉入孔内。

2.含易挥发溶剂、长时间静置动力学测试

优先选用55‑60 μL，补偿挥发损耗。不建议大于60 μL。同时缩短板放置到上机的等待时间，减少体积变化带来的偏差。

3.高粘度、易起泡样品

控制在45‑50 μL。体积偏大容易产生气泡，气泡会直接破坏测量，出现大量无效数据。加样时沿孔壁缓慢加入，避免冲击产生气泡。出现气泡的孔需要弃掉重新配制。

三、操作关键注意事项

1.整板所有孔尽量保持体积一致，同一块板最大体积差不超过±5 μL。孔与孔体积差异会带来液面高度不一致，八通道探针浸入深度相对改变，造成行与行之间系统偏差。

2.不可以使用普通商用96孔板随意替换DynePlate板。普通96孔板孔底高度、孔深度不一样，即使加入50 μL液体，实际液面高度和原装DynePlate板不一致，会导致探针浸入异常。

3.边缘孔挥发效应明显，即便体积加样准确，长时间放置后边缘孔实际体积会下降，建议加样后尽快上机；需要孵育时务必封板。

4.移液枪需要校准，低体积移液建议使用多通道移液枪，减少每孔加样体积离散。

四、体积异常带来的典型故障现象

体积过低：大量孔数据缺失、探针接触报警、表面张力数值整体偏高，平行样RSD显著变大。

体积过高：孔间串液、液体溅到板表面、测值系统性偏低，出现无规律异常点。

孔间体积不均：同一板内相同样品，不同行读数出现系统性偏移。